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NFAT-Luc/HEK293

CBP74028

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I. Background
      細(xì)胞內(nèi)鈣(Ca 2+)通過激活多種下游細(xì)胞介質(zhì)來調(diào)節(jié)多種細(xì)胞功能。細(xì)胞內(nèi) Ca 2+水平 升高導(dǎo)致 Ca 2+ 和鈣調(diào)蛋白依賴性磷酸酶鈣調(diào)磷酸酶的激活。鈣調(diào)磷酸酶可去磷酸化并激活 轉(zhuǎn)錄因子活化 T 細(xì)胞核因子 (NFAT) 家族,該家族在免疫功能、炎癥反應(yīng)、血管生成、 細(xì)胞增殖和分化中起關(guān)鍵作用。

      NFAT 家族由 NFAT1、NFAT2、NFAT3、NFAT4、NFAT5 五個(gè)成員組成,除 NFAT5 外, 該家族的所有其他成員都受細(xì)胞內(nèi) Ca 2+變化的調(diào)節(jié)。NFAT 蛋白具有一個(gè)保守的 N 末端結(jié) 構(gòu)域,其中包含多個(gè)絲氨酸殘基,這些殘基在靜息條件下被磷酸化。NFAT 蛋白的核轉(zhuǎn)位 在 N 末端調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域磷酸化后受到抑制。當(dāng)細(xì)胞受到刺激時(shí),絲氨酸殘基的去磷酸化是由 Ca 2+依賴性磷酸酶鈣調(diào)磷酸酶介導(dǎo)的。去磷酸化暴露了核定位信號(hào),并促進(jìn)了核轉(zhuǎn)位和 NFAT 調(diào)節(jié)基因的轉(zhuǎn)錄誘導(dǎo)。響應(yīng)鈣調(diào)磷酸酶 Ca 2+介導(dǎo)的激活,NFAT 蛋白可以自行誘導(dǎo)基 因表達(dá),也可以與其他轉(zhuǎn)錄因子協(xié)同誘導(dǎo)基因表達(dá)。NFAT 蛋白與其他轉(zhuǎn)錄因子(如激活 蛋白 1(AP-1)結(jié)合并協(xié)同發(fā)揮作用,以誘導(dǎo)基因轉(zhuǎn)錄。由于與其他轉(zhuǎn)錄因子相互作用, NFAT 蛋白可以整合來自不同途徑的信號(hào)并執(zhí)行多種細(xì)胞功能。NFAT 蛋白在免疫細(xì)胞中的 重要功能之一是誘導(dǎo)炎性細(xì)胞因子表達(dá)。
 
II. Description
      NFAT-Luc HEK293 報(bào)告基因藥靶模型很好的模擬了體內(nèi) NFAT 的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,原理見下圖所示。


Figure 1. NFAT-Luc HEK293 細(xì)胞模型原理圖
 
III. Introduction
Host Cell: HEK293
Expressed gene: NFAT-Luciferase
Stability: 32 passages
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: DMEM+10% FBS+200 ug/ml hygromycin
Mycoplasma Testing: Negative
Storage: Liquid nitrogen
Application(s): Functional(Report Gene) Assay
 
IV. Description of Host Cell Line
Organism: Homo sapiens, human
Tissue: Embryonic kidney
Disease: Normal
Morphology: Epitheloid
Growth Properties: Adherent
 
Ⅴ. Representative Data

Figure 2. Induction NFAT activity by Cell Stimulation Cocktail in NFAT-Luc HEK293(C4).

 


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